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Revista CyT.

SALUD
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Transplante de médula ósea
Buscarán la compatibilidad de donantes
con una técnica más económica

Un aporte científico trascendente para la comunidad realizará un equipo de profesionales del Laboratorio de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Excatas y Naturales y Agrimensura de la UNNE, cuando logren poner a punto una Técnica para tipificación de histocompatibilidad de pacientes y sus potenciales donantes de médula ósea.
La optimización de la técnica generará un impacto social,  ya que significará una importante reducción en los costos de los estudios para los pacientes que requieren de transplante de médula ósea.
El proyecto es uno de los trabajos aprobados en la Convocatoria de Proyectos Federales de Innovación Productiva (PFIP) 2006 del Consejo Federal de Ciencia y Tecnología de la Nación.
El transplante de células progenitoras hematopoyéticas (CPH) proveniente de la médula ósea o de la sangre periférica es un recurso de uso habitual para el tratamiento de enfermedades hematológicas tales como: leucemias agudas y crónicas, anemia aplástica severa, hemoglobinopatías y déficits inmunológicos congénicos.
El transplante implica en primera instancia la tipificación de moléculas de histocompatibilidad (Sistema HLA) por técnicas de Biología Molecular. Comercialmente, la técnica empleada disponible, es de un costo muy elevado. Esto se debe a que requieren de un kits para análisis bioquímico comercializado por laboratorios extranjeros, con un valor sujeto a las variables monetarias.

Tipificación. La tipificación de  histocompatibilidad consiste en determinar a través de un análisis de laboratorio cuan similares son los tejidos del receptor como del donante, de modo tal que no haya rechazo en la persona que recibe la médula. El estudio involucra al receptor y los donantes que generalmente son los hermanos de padre y madre, porque genéticamente se va a encontrar la mayor probabilidad de encontrar parecidos.
La importancia de contar con un estudio de este tipo económicamente más accesible está,  en que un análisis de histocompatibilidad involucra no solo al paciente sino a todo su grupo familiar potencialmente donante. Teniendo en cuenta que los componentes de una familia tipo de la región son elevado, sobre todo en la de bajos recursos, y sin cobertura social, implica un gasto en Salud Pública que atenta contra la posibilidad de sostener los estudios a corto y mediano plazo.

Ventaja. La doctora Laura Leiva una de las profesionales responsables del proyecto brinda más detalles sobre la técnica que se pondrá a punto y sus ventajas cn respecto a la de mayor costo. “La técnica comercial requiere de altas cantidades de una enzima denominada polimerasa, que es la que define el alto costo del test” explicó la bioquímica del Laboratorio de Química Biológica.
“Trabajaremos para poner a punto una técnica para detectar genes relacionados con la compatibilidad de tejidos, utilizando unas moléculas nucleicas pequeñas denominadas sondas de muy bajo costo comparado con la polimerasa”, explicó Leiva.
Si bien la técnica comercial es más rápida, no representa una ventaja comparativa “porque no se requiere de rapidez en los transplantes de médula con donante vivo”.

Puesta a punto. Otra de las bioquímicas del equipo la doctora Susana Soto explicó el trabajo de puesta a punto de la técnica. “Consiste de una tarea intensa y compleja de aproximadamente 20 meses, en la que se ensayan más de 100 sondas. La técnica resultante es sencilla y de fácil aplicación”.
El proyecto tiene dos etapas. La primera, es la puesta a punto. Se realiza el ajuste de condiciones experimentales ópitmas para la obtención del ADN, la amplificación por técnica de biología molecular (PCR)de los locus cromosómicos implicados en la histocompatibilidad.
También en esta etapa se realiza la selección de sondas que mejor representen la frecuencia poblacional de los genes HLA en la región.
“Cuando se busca sonda, se trabaja con una población que en este caso será el de la región. Cada zona que desea implementar la técnica, tiene que trabajar con sus habitantes. No es lo mismo haberla puesto a punto en Francia o Estados Unidos. Precisamente por ese motivo se requiere de una puesta a punto en la región”, explicó la doctora Soto.
La segunda etapa consistirá en comparar resultados con el test comercial. La técnica resultante se ensayará con muestras de pacientes que fueron tipificados con el método comercial. De esta manera se comprobará y demostrará la confiabilidad de la técnica.

Proceso. Los bioquímicos trabajarán con muestras de sangre de la que se extraerán ADN y la introducirán en un equipo denominado ciclador térmico. En el recinto se produce la reacción en cadena de la polimerasa.
Se amplifica un segmento del ADN. La porción amplificada se la estudia por locus con reacciones específicas. El locus es el lugar donde se encuentra el gen de un cromosoma. En este caso se trabajará con tres locus distintos, cada uno de los cuales llevará un conjunto de ensayos.
Se seleccionarán las sondas específicas que mejor representen la frecuencia poblaciónal de HLA en la región. De esta manera se sabrá con que kids de sondas representa mejor a los habitantes de la región.
“Contar con una técnica de esta envergadura nos permitirá no solo hacer estudios a pacientes, que es el objetivo actual. También tiene otras proyecciones, el hecho de que el HLA se herede de padres a hijos, nos permite hacer estudios poblacionales” señal+o la doctora Leiva.
“La molécula está muy asociada con enfermedades, por lo que podemos estudiar la suceptibilidad o protección a una enfermedad determinada” agregó la doctora Soto.

El otro aspecto importante del proyecto es la formación de recursos humanos y el equipamiento a los que accederá la Facultad de Ciencias Exactas de la UNNE. Para realizar la puesta a punto y la ejecución de la técnica se financiará la instalación de un Laboratorio de Biología Molecular. “Será importante para la formación docente y en investigación de los alumnos, además de un amplio campo de acción en los que podremos incursionar”, concluyó la doctora Soto.